石蜡切片与冰冻切片如何选择?

1、常规染色，组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。

原因：石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好，并且对抗原基本无影响

2、脂质染色(油红O染色，bodipy染色，尼罗红染色)必须做冰冻切片，不能做石蜡切片。

3、以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片：ROS染色，b-半乳糖甘酶染色，ATP染色，胆固醇染色。

4、如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片，将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。

5、组织形态结构保存完好顺序：新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。

取材及固定液使用注意事项：

1、取材手法：要求取材器械薄而锋利，避免挤压挫伤标本。

2、取材速度：尽量保证样本离体后5 min内放入到合适的固定液内。如果一只动物同时取多种器官，优先取消化器官，其次取中枢神经系统器官(脑，脊髓等)，皮肤、肌肉等可放到最后取。

3、组织块大小：未经灌注的标本组织厚度不要超过1 cm。

4、固定液：针对不同的标本特点及实验目的一定要选用赛维尔生物专用固定液，能更好的维持组织形态结构。

5、固定液量：组织要完全浸没在固定液中，且组织周围固定液范围大，不贴壁不挤压，并做好清晰标记。

6、固定温度：切勿冷冻结冰，否则固定液结冰形成冰晶严重破坏组织形态结构。