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本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠 7α,25-二羟基胆固醇(7α,25-HC)水平。用
纯化的小鼠 7α,25-二羟基胆固醇(7α,25-HC)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗
的微孔中依次加入 7α,25-二羟基胆固醇(7α,25-HC)，再与 HRP 标记的 7α,25-二羟基胆固
醇(7α,25-HC)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显
色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅
和样品中的 7α,25-二羟基胆固醇(7α,25-HC)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光
度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠 7α,25-二羟基胆固醇(7α,25-HC)浓度。