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本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠 7α-羟基胆固醇（7α-HC）水平。用纯化
的小鼠 7α-羟基胆固醇（7α-HC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中
依次加入 7α-羟基胆固醇（7α-HC），再与 HRP 标记的 7α-羟基胆固醇（7α-HC）抗体结
合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶
的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 7α-羟
基胆固醇（7α-HC）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准
曲线计算样品中小鼠 7α-羟基胆固醇（7α-HC）浓度。